استخراج، تخلیص و تعیین خصوصیات سوپراکسید دیسموتاز از برگ چای روییده در ارتفاعات مختلف

گونه های اکسیژنی فعال (ros)، هم در سلول های نرمال و هم در سلول های تحت تنش تولید می شوند. گیاهان دارای سیستم دفاعی پیشرفته ای برای مقابله با ros هستند که هم می تواند تولید آنها را محدود کند و هم باعث حذف آنها می گردد. در داخل سلول آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز، که تبدیل آنیون های سوپراکسید را به o2 و h2o2 کاتالیز می-کنند، اولین خط دفاعی در برابر ros را تشکیل می دهند. بنابراین آنزیم سوپراکسید دیسموتاز به صورت بالقوه برای درمان اختلالات التهابی مفید است. در این تحقیق، تخلیص آنزیم سوپراکسید دیسموتاز از گیاه چای، که غنی از آنتی-اکسیدان ها است، انجام گرفت. روش تخلیص شامل استخراج عصاره ی آنزیمی توسط بافر فسفات و به دنبال آن استفاده از ستون تعویض یونی deae است. فعالیت ویژه ی آنزیم سوپراکسید دیسموتاز u/mg protein 74/0 بدست آمد. آنالیز توسط ژل sds-page باندی در نزدیکی kda 50 را نشان داد. ph بهینه برای این آنزیم 5/7 محاسبه شد و دمای بهینه نیز ?c25 بدست آمد. آنزیم تخلیص شده دارای mm 73/0= km یا سوبسترای nbt بود و vmax برای این آنزیم ?mol/min 09/12 محاسبه شد. در بخش دیگری از این مطالعه، اثر ارتفاع بر فعالیت و خصوصیات سینتیکی آنزیم سوپراکسید دیسموتاز بررسی شد. به این منظور، برگ گیاه چای از سه ارتفاع 534، 305 و 50 متر برداشت شد و مورد آزمایش قرار گرفت و تفاوت قابل توجهی در فعالیت و خواص سینتیکی آنزیم سوپراکسید دیسموتاز در سه ارتفاع مختلف مشاهده شد.